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WB与IP常见问题解析及解决方法 在蛋白免疫实验中,Western Blot(免疫蛋白印迹,简称WB)和Immunoprecipitation(免疫沉淀,简称IP)是两种常见的蛋白免疫实验方法。以下是对这两种方法常见问题的分析和解决方法: IP背景高的问题及解决方法 미 在进行IP实验时,背景过高可能会影响实验结果。以下是一些可能的原因和解决方法: 抗体浓度过高:调整抗体浓度,使用较低浓度的抗体。 非特异性结合:使用封闭剂减少非特异性结合。 实验条件:优化实验条件,如温度、时间和pH值。 检测到目的蛋白的原因 在IP实验中,如果检测到了目的蛋白,可能是以下原因: 抗体特异性好:抗体能够特异性地识别目的蛋白。 样品处理:样品处理过程中没有损失目的蛋白。 WB条带问题及解决方法 WB实验中,条带可能出现多种问题,如白板、高背景、条带弱、分布不均匀或位置异常。以下是一些可能的解决方案: 白板:检查抗体浓度和封闭剂使用情况。 高背景:调整抗体浓度,优化曝光时间。 条带弱:增加抗体浓度,调整曝光时间。 分布不均匀:优化样品处理和电泳条件。 位置异常:检查抗体孵育和转移条件。 通过以上方法,可以有效解决WB与IP实验中常见的问题,提高实验结果的准确性和可靠性。
祖母绿优化处理详解:从无到有的过程 祖母绿,这种珍贵的宝石以其独特的绿色和稀有性而闻名。然而,由于生长条件和宝石学特征,祖母绿通常具有多裂和丰富的包裹体。为了提升其净度和美观,祖母绿经常需要进行优化处理。 优化处理类型 祖母绿的优化处理方式多种多样,包括充填法、拼合和覆膜处理等。其中,无色充填处理是最常见且被大众接受的方法,它能够有效提高祖母绿的净度。 充填处理程度 无色充填处理的程度直接影响祖母绿的市场价值。宝石实验室将祖母绿的充填程度分为以下几个级别: 无净度优化处理迹象 无油祖母绿,裂隙中可能见少量切割抛光残余物 极轻度的净度优化处理迹象 轻度净度优化处理迹象 轻度到中度的净度优化处理迹象 中度的净度优化处理迹象 显著的净度优化处理迹象 ️ 优化处理的目的 通过优化处理,祖母绿的晶体质量得以提升,同时也能降低佩戴过程中的破碎风险。因此,祖母绿的净度优化显得尤为重要。 ᠦ事项 在购买祖母绿时,了解其优化处理程度至关重要。充填程度越重,说明充填物含量越多,这可能会影响祖母绿的价值和耐用性。 通过这些信息,您可以更好地评估祖母绿的价值和品质,从而做出更明智的购买决策。
如何用数据驱动产品规划:广度与深度并重 嘿,大家好!今天我们来聊聊如何用数据来驱动产品规划,从广度和深度两个方面来思考。这个话题其实有点大,但我们尽量把它讲得有趣又实用。 产品分析的三大类项目 首先,产品分析可以分为三大类项目: 长期规划(Long-term Planning):用数据来帮助产品经理(PM)全局性地规划下一个季度应该聚焦哪些产品创新。 特定需求(Ad-hoc Request):不定期地解答PM突然滋生的产品创新想法是否值得投入。 项目优先级排序(Project Prioritization):对计划中的项目进行影响力大小的估算,帮助PM做优先级排序。 深入浅出:长期规划的两种方式 𑊊我们先来聊聊长期规划。如果你想从广度上罗列下个季度可以聚焦的产品优化点,可以参考第二期提到的product opportunity的例子,找到那些对用户留存至关重要的功能,推荐PM做进一步优化。 而如果你想从深度上罗列某个产品环节的具体优化点,可以做product deep dive。这个目标的目的是通过对产品过去、现在和未来的调研,深入了解用户和产品在这一环节的交互,从而发掘可优化的空间。 Product Deep Dive的三大步骤 产品进化(Product Evolution):整理产品中的各项功能是何时添加的,如果添加是基于AB实验,那么当时该功能产生的影响力是什么。同时整理那些实验过却没有被推广到产品中的功能。 成果表格:每一行对应一个实验过的产品功能,按时间排序。列可以包含该功能的实验时间、实验结果以及是否被推广到产品中。这样PM对什么功能测试过一目了然,也能知道一个功能需要达到怎么样的影响力才会被推广。 功能使用率(Feature Engagement):整理用户对每个功能的使用率。并且如果用户存在着和产品交互呈现异化行为的分组,也同时整理每个用户组的使用率。 成果表格:每一行对应该产品现存的一个功能,按照整体用户对它的使用率排序。列可以包括不同的用户分组,来展示每个用户组对该功能的使用率。这样PM对什么功能使用率高,因此紧关用户体验,什么功能使用率低,因此可被更好的功能替代一目了然。对于总体使用率低的功能,也能排除它是否对特定的用户群十分重要。 竞争对手分析(Competitive Analysis):整理同类产品推出的功能,与自身的产品功能做比较,提出可借鉴的地方。 成果表格:每一行对应一个产品功能,每一列对应一个同类的产品,然后凸显哪些功能别的产品有,而我们没有。这样PM对哪些功能是竞争产品拥有的一目了然,便可以尝试实验那些我们没有的功能。 好了,今天的分享就到这里。希望这些方法能帮到你们在做产品规划时更有条理、更数据驱动。如果有任何问题或想法,欢迎在评论区留言,我们一起讨论!쀀
Gen AI的三大应用领域 Gen AI,即生成式AI,在多个领域展现了其强大的潜力。在生命科学和医疗保健行业,Gen AI的应用尤为引人注目。以下是三大主要应用领域: 1️⃣ 升运营效率:Gen AI能助力企业通过更少的资源实现更多成果,优化实验设计,甚至用于新药开发。同时,它还能提供自动化的合规性支持,释放员工生产力,从而改善企业运营绩效。 2️⃣ 个性化医疗体验:Gen AI让患者、客户和员工享受到更加个体化、目的明确和超个性化的体验。通过优化患者旅程,关注健康结果,推动虚拟治疗等差异化服务,提升护理质量和健康结果。 3️⃣ 增强数字和数据能力:Gen AI作为组织技术生态系统的关键部分,能更轻松地查询企业代码和数据集,提供预测性建议,帮助扩展资产效用。此外,它还能通过智能语义搜索改进决策,助力企业应对人力资源挑战。 随着技术的不断进步,Gen AI在各行各业的应用将更加广泛和深入。让我们一起期待它带来的更多可能性吧!
科研学习复盘:从输入到输出的全面梳理 复盘可以帮助我们提高在科研学习过程中的决策能力和全局观,从而实现对每一阶段计划的有效更新和优化。下面,我将从输入部分(文献阅读)和输出部分(实验过程)两个方面来谈谈科研学习的复盘。 ᠦ献阅读复盘 每周和每月的复盘:定期回顾和总结文献阅读的情况。 分类整理和知识梳理:将文献进行分类整理,重点标记纸质笔记,电子版笔记可以做成思维导图,便于之后查找。 记录阅读过程中的灵感:对阅读过程中产生的灵感进行归纳和思考。 标记重要文献:对目前课题有重要意义的文献进行标记和复习,结合理论和实践,尝试将得到的启发和对实验的优化进行实践。 复盘阅读质量:关注阅读的文献来源的期刊和年份,尝试阅读更新、水平更高的杂志中的文章。 调整阅读数量:根据复盘结果,制定适合自己下一阶段的阅读计划。 젥ꌨ🇧若䍧 每日、每周和每月的复盘:定期回顾和总结实验过程。 复盘实验目的和结果:如果结果实现了,考虑下一步的实验内容;如果结果失败了,分析所有可能的原因。 总结失败经验:针对失败的结果或者部分不顺利的结果,思考哪些地方做得没有问题,哪些地方做得不够好,有多少提升空间,写下优化的方案。注意实践和理论相互结合,遇到问题除了凭经验解决问题,还要记得查文献或者其他资料。 总结成功经验:做得好的部分形成自己的实验技能体系,并持续优化。 制定下一阶段计划:根据复盘结果,使用KISS复盘模型(继续的实验、改进的实验、中止的实验、开始的实验)制定下一阶段的计划。 希望这些方法能帮助大家在科研学习过程中更好地复盘,实现更好的科研成果!
用户研究小贴士:让你的产品更贴近用户 堧覈𗧠究 用户研究是用户中心设计流程的第一步,主要目的是帮助企业定义产品的目标用户群。通过深入了解用户的需求和目标,并将其与商业宗旨相匹配,企业可以更准确地定义产品的目标用户群。用户研究的核心在于发现用户的痛点,这通常需要通过前期用户调查和情景实验来实现。 定义与价值 用户研究的主要任务是明确产品的用户需求,细化产品概念,并通过研究用户的任务操作特性、知觉特征和认知心理特征,使产品设计更符合用户的习惯、经验和期待。在互联网领域,用户研究主要应用于两个方面: 1⃣️ 对于新产品,用户研究用于明确用户需求,帮助设计师选定设计方向; 2⃣️ 对于已发布的产品,用户研究用于发现产品问题,帮助设计师优化产品体验。 用户研究不仅对公司设计产品有帮助,而且让产品的使用者受益。对公司来说,用户研究可以节约时间、开发成本和资源,创造更好更成功的产品。对用户来说,用户研究使得产品更加贴近他们的真实需求。通过对用户的理解,我们可以将用户需要的功能设计得有用、易用并且强大,能解决实际问题。 研究内容 用户研究的主要内容包括: 用户群特征 产品功能架构 用户任务模型和心理模型 用户角色设定 步骤方法 用户研究的步骤如下: 1⃣️ 前期用户调查 2⃣️ 情景实验 3⃣️ 问卷调查 4⃣️ 数据分析 5⃣️ 建立用户模型 通过这些步骤,我们可以更深入地了解用户的需求和期望,从而设计出更符合用户习惯和需求的产品。
探索His标签的奥秘 你是否对His标签感到好奇?让我们一起来探索这个蛋白标签的奇妙世界吧! ᠈is标签,也被称为His6标签,是生物化学和分子生物学领域中常用的一种蛋白标签。它通常被用于蛋白纯化过程,因为His标签能与特定的金属离子如镍离子结合,从而使得目的蛋白能够被高效地纯化出来。 젥觧研实验中,选择合适的蛋白标签至关重要。除了His标签外,还有许多其他类型的标签可供选择,如Flag标签、GST标签、HA标签等。每种标签都有其特定的用途和原理,例如,Flag标签常用于Western Blot分析,而HA标签则适用于免疫共沉淀实验。 那么,如何选择合适的蛋白标签呢?首先要考虑实验目的,例如,如果是为了纯化蛋白,那么His标签无疑是一个不错的选择。其次,还需要评估标签对目的蛋白的表达是否会产生干扰,以及标签应该标记在目的蛋白的N端还是C端。 总的来说,His标签以其独特的性质和用途,在生物化学和分子生物学领域中占据了重要的地位。通过深入了解这些标签的原理和应用,我们可以更好地设计和优化科研实验方案。 现在,你是否对His标签有了更深入的了解呢?如果你还有其他问题或想了解更多信息,欢迎随时提问哦!
论文写作全攻略:选题、降重、格式一步到位 𒾥选题,瞄准前沿且富有研究价值的方向,例如“新能源汽车电池续航优化策略研究”。 搭建清晰大纲,引言部分介绍背景与目的,正文分板块论证,结论部分总结升华。 利用学术资源,如谷歌学术、学校图书馆数据库搜集资料,并做好引用标注。 行文逻辑连贯,段落衔接自然,善用连接词,如“然而”“此外”“综上所述”等。 降重实用技巧: 词句替换,将“许多”换成“诸多”,“因为”换成“由于”等。 调整语序,“我们通过实验得到了数据”改为“数据是我们通过实验得到的”。 化整为零,长句拆短句;反之,短句合成长句。 借助降重软件辅助,但注意修改其不合理之处。 格式调整规范: 字体字号:标题多为宋体加粗,正文宋体小四号,英文用 Times New Roman。 间距设置:正文 1.5 倍行距,段前 0.5 行,段后 0.5 行,各级标题依级别调整。 参考文献:按要求著录,如书籍[序号]作者.书名[M].版本.出版地:出版者,出版年:起止页码。 掌握这些技巧,让你的论文轻松脱颖而出!
MAPK通路蛋白:MEK1/2&ERK 前情提示: 1️⃣ 所有实验结果均来自小鼠肝脏组织的蛋白样本(由于模型复杂且干预因素众多,具体细节不赘述)。 2️⃣ 电泳液、转膜液、TBST均采用粉末配置成10X,再稀释至1X(经济节约)。电泳时间未详细记录,转膜条件为300mA,70分钟。 3️⃣ 一抗孵育时间为14-16小时,洗膜步骤为1✖️TBST,5分钟*3;二抗孵育时间为1小时,洗膜步骤为1✖️TBST,10分钟*3。 图一:MAPK通路,MEK1/2,稀释比1:1000,结果显示条带清晰,无杂带,目的条带表达强烈。 图二:MAPK通路,ERK,稀释比1:1000,条带位置清晰,基本无杂带。 图三:MAPK通路,p38,条带较为杂乱,可能原因包括一抗特异性不足或稀释比需要调整。pp38条带位置与预期有所不同,需要进一步优化实验条件。 作为WB新手,欢迎各位高手交流实验经验!
biorxiv 分享一个上个月在BioRxiv上发表的CRISPR knockin协议。这个协议从gRNA设计、同源臂设计、克隆到编辑和选择都有详细的指导。最棒的是,作者优化了一系列的质粒,包括各种荧光标签、表位标签和TurboID。这些质粒设计了许多实用的酶切位点,方便根据需要进行替换和选择标记。这些质粒都可以在Addgene上直接购买。简直不要太方便! 砦谢Pelletier实验室,这对没有Knockin经验的学生来说真的是福音。如果你有Knockin的需求,强烈推荐看看这个协议。我自己还没用,等过一个月再来分享实际使用的感受! 协议的主要步骤包括: 设计gRNA和同源臂 克隆质粒 细胞培养 验证和选择 ️ 具体操作包括: 使用QIAGEN Plasmid Plus Midikit提取高质量的质粒DNA。 通过PCR扩增qTAG cassette,并使用Gibson Assembly进行四片段组装。 将组装好的质粒转入细菌中进行扩增,并使用QIAquick Gel Extraction Kit纯化质粒。 将纯化后的质粒转入细胞中进行编辑,并通过PCR和测序验证编辑结果。 这个协议不仅提供了详细的步骤,还解释了每个步骤的目的和注意事项。无论你是初学者还是有一定经验的科研人员,这个协议都能帮助你顺利完成CRISPR Knockin实验。
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